WHO推荐诊断结核病的创新技术---结核分枝杆菌基因X-pert检测(Xpert MTB/RIF )

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结核病俗称“痨病”,是由结核分枝杆菌(M.tuberculosis)感染引起的慢性传染病,可侵及多个脏器,其中以肺部受累,即肺结核,它是一种慢性和缓发性传染病。若能及时诊断,并予合理治疗,大多可获临床痊愈。根据2022年10月27日WHO发布的《2022年全球结核病报告》,2021年中国新发约78万,占全球总数的7.4%。在30个结核病高负担国家中,我国结核病发病数排第三位,低于印度(295万)和印度尼西亚(96.9万)。吸烟是中国结核病发病的主要危险因素。

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结核病实验室诊断是发现结核病的重要途径,以往涂片和培养是结核病的主要细菌学检测手段。但涂片检测敏感度低,我国涂片结核检出率约为30%,且无法区分肺外结核;培养则大大提高了结核杆菌检出的阳性率,并且可进一步进行菌种和药敏鉴定,但结核杆菌菌体外生长十分缓慢,需4~8周才能得到结果;结核分枝杆菌基因X-pert检测(Xpert MTB/RIF )仅需5个纯化DNA基因片断或131个菌落/ml即可检出结核菌,2小时可出结果,还可同时检测利福平耐药(rpoB基因)。这样的方法学特性,使得它在排菌量较少的结核病人中,检出效率和时间更有优势。新发表的一项肺结核大样本研究显示,在1103个诊断肺结核的病人中,超过十分之一(121人,11%)的病人的痰涂片、培养阴性,但Xpert MTB/RIF检测为阳性。

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我国于2017年重新修订了“肺结核诊断WS 288-2017”,此标准中将分子生物学诊断阳性作为病原学阳性的诊断依据。Xpert MTB/RIF 2次被WHO推荐为建议使用的创新技术, 并在“第三版结核关怀国际标准(2014年)”中,推荐用于多种情况下的结核初始诊断方法。


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结核病常见的表现有哪些呢?

感染结核病常表现为午后低热、乏力、食欲减退、消瘦、盗汗等。肺结核患者还有胸痛、胸闷、咳嗽、咳痰,继发感染时,痰呈粘液脓性或痰中带血。

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什么是Xpert MTB/RIF检测技术呢?

Xpert MTB/RIF检测是一种基于聚合酶链反应(PCR)的分子诊断方法,它通过检测结核分枝杆菌DNA中特定的基因序列来确定是否存在结核感染,并且可以同时检测耐药性相关基因。该技术利用了PCR技术对DNA进行扩增和检测,从而在短时间内提供准确可靠的结果。

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Xpert MTB/RIF技术原理主要通过哪些步骤来实现?

(1)样本采集:通常使用痰液作为样本,也可以使用其他体液如尿液或脑脊液。

(2)样本处理:将样本与试剂混合,使结核分枝杆菌DNA释放出来。

(3)PCR扩增:将样本置于Xpert MTB/RIF设备中,该设备会自动进行PCR扩增反应,产生大量的结核分枝杆菌DNA复制品。

(4)结果分析:Xpert MTB/RIF设备会通过荧光信号检测结核分枝杆菌DNA是否存在,并根据荧光信号的强度来确定感染程度和耐药性。

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相比传统的结核病诊断方法

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Xpert MTB/RIF技术有什么优势呢?

(1)快速结果:该技术只需2小时即可提供结果,大大缩短了诊断时间。

(2)高准确性:由于采用了PCR技术,该技术对结核分枝杆菌的检测灵敏度和特异性都很高。

(3)自动化操作:Xpert MTB/RIF设备能够自动完成PCR扩增和结果分析过程,减少了人为误差。

(4)多重检测功能:除了检测结核分枝杆菌感染外,该技术还可以同时检测耐药性,提供更全面的诊断信息,帮助医生选择合适的抗结核药物治疗方案。

(5)早期诊断:Xpert MTB/RIF技术能够快速、准确地检测结核分枝杆菌感染,有助于早期发现和治疗患者。

(6)感染筛查:由于该技术操作简便、结果迅速,可以广泛应用于结核病高风险人群的感染筛查工作。及时有效控制结核播散。

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Xpert MTB/RIF 诊断的临床意义是什么?

(1)结核分枝杆菌核酸检测阳性及胸部影像学检查支持即可确诊;

(2)疑似肺外结合患者(结核性脑膜炎、结核性胸膜炎、泌尿结核、骨结核、生殖结核等),核酸检测阳性,可辅助诊断;

(3)利福平耐药性阴性,可将利福平作为一线抗结核药物进行抗结核治疗并定期复查;

(4)利福平耐药阳性,无论是否异烟肼耐药,建议使用二线抗结核药物治疗并定期复查;

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结果判读及临床解释

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备注:MTB即结核分枝杆菌复合群,是结核病的病原体,该复合群主要包含人结核分枝杆菌、牛结核分枝杆菌、非洲分枝杆菌、田鼠分枝杆菌。Rif Resistance即利福平耐药

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标本留取

(1)痰标本:①用清水漱口两次;②用力咳嗽,采集痰液>1ml,将咳出物收集到无菌旋盖的样品采集容器中,避免溢出或弄脏容器外表面;③旋紧收集装置的盖子;

(2)肺泡灌洗液标本:①无菌条件下采集肺泡灌洗液标本;②采集肺泡灌洗液标本>1ml,将灌洗物收集到无菌旋盖的样品采集容器中,避免溢出或弄脏容器外表面;③旋紧收集装置的盖子;

(3)各种穿刺液(关节腔,脑脊液等)标本:①无菌条件下采集穿刺液标本;②采集穿刺液标本>1ml,将穿刺液收集到无菌旋盖的样品采集容器中,避免溢出或弄脏容器外表面;③旋紧收集装置的盖子;

(4)淋巴结及其他组织标本:①无菌条件下采集淋巴结及其他组织标本;②采集的组织标本至少50mg,将淋巴结及其他组织收集到无菌旋盖的样品采集容器中,避免溢出或弄脏容器外表面;③旋紧收集装置的盖子;

所有标本需2h内运送至实验室进行检测。 

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检测及报告时间

(1)检测时间为正常上班时间(上午8:00-11:30,下午14:30-17:30);

(2)结果报告时间:当天上午11:00前接收的标本下午15:30点前发报告,上午11:00后接收的标本次日上午10点前发报告。

Xpert MTB/RIF技术是一项革命性的新技术,为结核病的诊断和治疗带来了巨大的进步,它不仅能够快速、准确地检测结核分枝杆菌感染,还能够同时检测耐药性。相信随着该技术的推广应用,将有助于更好地控制和预防结核病的传播,保障公共卫生安全。

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温馨提示:如果确诊为结核菌感染,需要及时就医,遵医嘱进行相应的治疗,以免耽误病情。

END

文/ 医学检验科  朱德永


图片制作/宣传科  熊兴莲


审核/医学检验科  陆兴热



各院区目前科室分布情况


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总院科室布局


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开化院区科室布局


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重要提醒:体检科、口腔科、高压氧室和急救中心也设置在老院区!




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新平院区科室布局


感染性疾病科、精神一病区、精神三病区


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